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Groupe de cas d’hépatite aiguë associée à l’infection par le virus de l’hépatite E acquise aux Pays-Bas

Des preuves de plus en plus nombreuses suggèrent que l’infection par le virus de l’hépatite E peut se produire dans les pays développés et que les porcs peuvent agir comme réservoir Nous signalons un groupe de cas confirmés et de cas présumés d’hépatite associée au VHE La souche typée du cas était apparentée aux souches du VHE trouvées dans le Nord. Nos résultats indiquent que les infections à VHE contractées localement dans les pays industrialisés peuvent être négligées Les tests de routine pour l’infection par le VHE chez les patients atteints d’hépatite aiguë aux Pays-Bas doivent être considérés. avant qu’un diagnostic d’hépatite auto-immune soit atteint et qu’une thérapie aux stéroïdes est initiée

Virus de l’hépatite E Le VHE est une cause majeure d’hépatite non A, non B transmise par voie entérique dans les pays pauvres, présentant souvent de grandes poussées d’hépatite dans lesquelles l’eau contaminée par les fèces est habituellement impliquée L’infection par le VHE est également considérée comme une cause majeure Les cas cliniques d’infection par le VHE dans les pays développés ont généralement été associés au voyage dans les pays tropicaux ou subtropicaux Serosurveys avec des tests récemment développés pour les anticorps anti-VHE, cependant , ont toujours indiqué une faible séroprévalence des anticorps contre le VHE% -% dans les pays où l’infection par le VHE n’est pas considérée comme endémique [,,, -] Il y a eu également un nombre croissant de cas d’hépatite sporadique signalés en Europe et aux Etats-Unis. au VHE, mais pas associé aux voyages [, ,,,, -], conduisant à des suggestions selon lesquelles le VHE peut être endémique à de faibles niveaux dans les pays développés. Une épidémie d’infection par le VHE a été signalée dans les pays développés Des souches de VHE apparentées à celles qui infectent l’homme ont été trouvées chez des porcs aux Pays-Bas et aux États-Unis , ce qui soulève la possibilité que humains En juillet, un laboratoire microbiologique régional du nord des Pays-Bas a informé l’Institut national de la santé publique des personnes âgées qui se sont présentées au même hôpital local avec une hépatite aiguë au cours des mois précédents et qui se sont révélées séropositives pour l’infection par le VHE. décrire l’investigation de cette grappe de cas d’hépatite

Méthodes

Les patients ont été interrogés à domicile avec un questionnaire pour recueillir des informations sur les expositions pertinentes. Le consentement éclairé a été obtenu auprès de tous les patients. La société d’approvisionnement en eau qui fournissait tous les patients a été contactée Problèmes concernant la qualité de l’eau dans les mois précédant les maladies des patients Etudes de laboratoire Tous les patients ont présenté des résultats négatifs aux anticorps IgM contre l’hépatite A, à l’antigène de surface de l’hépatite B et aux anticorps dirigés contre l’antigène nucléocapsidique de l’hépatite B pour les anticorps IgM contre Epstein. Les trois EIA commerciaux ont été utilisés pour le diagnostic sérologique de l’hépatite E: des tests qui ont testé les anticorps IgG anti-IgG HEV IgG [Genelabs Diagnostics] et Abbott HEV EIA [Laboratoires Abbott] et qui ont testé les anticorps anti-IgG anti-hépatite C et Coxiella burnetii. testé pour les anticorps IgM HEV IgM ELISA [Gene Laboratoires Diagnostics] Tous les tests ont été effectués deux fois, et seuls des échantillons réactifs répétés ont été jugés positifs pour tout test, comme recommandé par les fabricants. Pour confirmation, le premier échantillon obtenu de chaque patient a été testé par immunoblot. Antigènes du VHE coli L’ARN a été extrait des échantillons de sérum et de selles Les techniques de RT-PCR ont été utilisées pour détecter et séquencer un segment bp du cadre ouvert de lecture du génome du VHE suivi d’une analyse phylogénétique, par des méthodes décrites ailleurs

Résultats

Caractéristiques cliniques Deux cas sont survenus chez des femmes âgées respectivement d’un an et un autre chez un homme. Les dates d’apparition des symptômes d’ictère et / ou de vomissements étaient en décembre pour le patient, mai pour le patient, et Patients hospitalisés et patients hospitalisés pendant des jours et des jours, respectivement, ayant reçu un traitement symptomatique. Cas du patient présentant des nausées et des vomissements, mais pas de jaunisse, et a été traité Selon les dossiers médicaux, les patients atteints de l’ictère ont pris des mois pour se rétablir complètement, tandis que le patient patient non utérin s’est rétabli en quelques semaines. Les résultats ont été positifs pour les patients. Anticorps anti-IgG dirigés contre le VHE par les deux essais commerciaux Un échantillon de sang obtenu huit semaines après l’apparition de la maladie et un deuxième échantillon prélevé sur le patient trois semaines après le début du test. Les sérums sont positifs pour l’anticorps IgM. Un échantillon de sérum prélevé sur le patient huit semaines après l’apparition de symptômes spécifiques. les résultats positifs pour les IgG ont été confirmés par l’utilisation du test d’immunoblot dans tous les cas, mais seuls les résultats d’EIA positifs pour les IgM ont été confirmés par l’utilisation du test immunoblot.

Diapositives de test sérologique pour les anticorps anti-virus de l’hépatite E dans des échantillons de sang prélevés sur des patients atteints d’hépatite aiguë, Pays-Bas, Tableau View largeDownload slideRésultats des tests sérologiques pour les anticorps anti-hépatite E dans des échantillons sanguins de patients atteints d’hépatite aiguë. Pays-Bas, Des échantillons de selles ont été prélevés chez des patients et au début et à l’après-jour respectivement. Aucun virus n’a été détecté par RT-PCR. L’ARN du VHE a été détecté par PCR dans l’échantillon de sérum de phase aiguë prélevé chez le patient. le segment amplifié de ORF s’est avéré étroitement apparenté aux sous-groupes de souches porcines hollandaises dans le génotype III. Il y avait une différence de% nucléotide par rapport à la souche porcine hollandaise NL-Swine et une différence de nucléotides par rapport à la souche humaine la plus proche.

Figure Vue largeDisque de téléchargement Arbre arboricole phylogénétique montrant les relations entre souches humaines et porcines sélectionnées du virus de l’hépatite E HEV basé sur une séquence -bp du cadre de lecture ouvert ORF La séquence du cas NL-Groningen est représentée avec des souches porcines néerlandaises NL-Swine et NL -Swine avec des isolats étrangers qui se regroupent avec ces séquences, ainsi que des isolats prototypes provenant de différentes grappes. Les nombres représentent les longueurs de ramifications, qui sont proportionnelles à la distance évolutive entre les séquences souches humaines et porcines HEV: Us, Us, et US-Swine GenBank accession nos AF, AF et AF, respectivement; Souches grecques de VHE humain: Grèce et Grèce: AF et AF, respectivement; Isolat humain argentin: accession de l’Argentine non AF; Isolats humains birmans: Birmanie et Birmanie n ° M et D, respectivement; Souche humaine italienne: Italie accession no AF; Souche humaine pakistanaise: accession au Pakistan non M; Souche humaine mexicaine: Mexique accession no M; Souches humaines chinoises: Chine, Chine et Chine, accession D, AJ et D respectivement; Isolats humains indiens: Inde, Inde et Inde, numéros d’accession X, X et AF, respectivement; Souche humaine népalaise: accession au Népal AFFigure View largeToile de téléchargement Arbre arboricole phylogénétique montrant les relations entre souches humaines et porcines sélectionnées du virus de l’hépatite E HEV basé sur une séquence -bp de cadre ouvert de lecture ORF La séquence du cas NL-Groningen est représentée avec prototype néerlandais souches porcines NL-Swine et NL-Swine avec des isolats étrangers qui se regroupent avec ces séquences, ainsi que des isolats prototypes provenant de différentes grappes Les nombres représentent les longueurs de ramifications, qui sont proportionnelles à la distance évolutive entre les séquences souches humaines et porcines HEV: Us, Nous, et US-Swine GenBank n ° d’accession AF, AF et AF, respectivement; Souches grecques de VHE humain: Grèce et Grèce: AF et AF, respectivement; Isolat humain argentin: accession de l’Argentine non AF; Isolats humains birmans: Birmanie et Birmanie n ° M et D, respectivement; Souche humaine italienne: Italie accession no AF; Souche humaine pakistanaise: accession au Pakistan non M; Souche humaine mexicaine: Mexique accession no M; Souches humaines chinoises: Chine, Chine et Chine, accession D, AJ et D respectivement; Isolats humains indiens: Inde, Inde et Inde, numéros d’accession X, X et AF, respectivement; Souche humaine népalaise: accession au Népal AFE enquête épidémiologique Tous les patients vivaient à ⩾ km l’un de l’autre dans le nord-est des Pays-Bas. Aucun facteur de risque évident d’infection n’apparaissait dans les questionnaires remplis. Les patients vivaient séparément et ne se connaissaient pas. aucun antécédent de voyage en dehors des Pays-Bas dans les mois précédant le début de la maladie Les patients ont déclaré avoir bu de l’eau du robinet et aucun antécédent de consommation de crustacés Un patient avait mangé au restaurant dans les mois précédant le début de la maladie. Les patients vivaient dans une ferme ou près de tout bétail, et aucun problème avec le rat n’a été signalé. Le patient avait un contact régulier avec un chien, le patient avait un contact régulier avec un chat et le patient avait un contact occasionnel avec une chèvre. subi des opérations dans les mois précédant la maladie, ni reçu de sang ou de produits sanguins ou d’injections autres que Vaccination antigrippale Aucun membre de la famille ou proche contact du patient n’a été déclaré malade dans les mois précédant la maladie du patient. La seule compagnie d’eau qui a fourni toutes les maisons n’a signalé aucune contamination bactériologique de l’approvisionnement en eau pendant les tests de routine. Réglementation néerlandaise sur l’eau potable dans les mois précédant ces cas

Figure Vue largeTélécharger le diaporamaCarte des Pays-Bas ▪, Zone où les cas sont survenusFigure Voir grandTélécharger le diaporamaCarte des Pays-Bas ▪, Zone où les cas se sont produits

Discussion

essai de transfert; symptômes cliniques; l’exclusion d’autres causes infectieuses de l’hépatite; L’absence d’anticorps IgM détectables dans l’échantillon prélevé sur le patient huit semaines après l’apparition de la maladie n’est pas inattendue, car plus de la moitié des patients avec VHE confirmé Il a été démontré que l’infection est séronégative pour les anticorps IgM un mois après le début de la maladie Malheureusement, l’absence de données de séquences virales chez les patients n’a pas permis de lier les cas au moyen de méthodes moléculaires et de confirmer l’existence d’une épidémie d’infection Néanmoins, les caractéristiques épidémiologiques de cette grappe suggèrent un lien, car les patients ont vécu très près les uns des autres et ont été infectés en l’espace de mois ont été infectés dans le même mois L’âge avancé des patients est également curieux, car le taux d’attaque de l’infection clinique dans les épidémies est généralement signalé comme étant le plus élevé chez les jeunes hommes les patients n’ont rapporté aucun contact étroit humain, ils ont pu être infectés involontairement d’un autre patient clinique ou d’un patient avec une infection subclinique Une infection subclinique au VHE acquise aux Pays-Bas a déjà été signalée ailleurs , et dans des pays L’infection par le VHE est endémique, les preuves sérologiques suggèrent qu’il y a au moins deux fois plus de cas subcliniques que les cas cliniques Les cas peuvent avoir fait partie de la transmission interpersonnelle continue aux Pays-Bas et ne sont détectés que par hasard. il a été démontré que la transmission est rare dans les zones d’endémicité et devrait l’être particulièrement dans un pays où les systèmes d’assainissement sont bons. Une autre possibilité est la survenue spontanée d’éclosions d’infection chez des populations de souches du VHE. porcs, cas humains importés ou, à la limite, provenant de denrées alimentaires importées Des cas de transmission alimentaire ont été signalés, en particulier en Chine , et les mollusques ont L’eau contaminée, la source habituelle dans les pays en développement, reste une source possible d’infection pour ces cas. Bien qu’aucune contamination bactériologique de l’approvisionnement en eau n’ait été signalée dans les mois précédant ces cas, le VHE a pu néanmoins être présent. La séquence nucléotidique de la souche infectante issue du cas le place dans le génotype III avec des séquences humaines et porcines américaines et européennes, et elle est étroitement apparentée aux souches porcines hollandaises et aux cas de Les humains en Grèce Le génotype III est clairement distinct des génotypes I, II et IV, qui contiennent des séquences du sous-continent indien, du Mexique et de la Chine, respectivement. Cela soulève la possibilité que ces patients soient infectés par des souches endémiques en Europe. soit des souches qui circulent parmi les humains, soit des infections dites «de débordement» provenant d’un réservoir de porcs des terres, le pourcentage de troupeaux porcins testés était infecté par des souches de VHE apparentées à des souches humaines de VHE Des études expérimentales ont montré que les souches de VHE de porcs avec des primates non humains et des souches humaines avec des porcs étaient infectieuses croisées. Le diagnostic de l’infection par le VHE aux Pays-Bas, la plupart des tests du VHE étant effectués par le Laboratoire central du service de transfusion sanguine Amsterdam En partie, des tests commerciaux de détection du VHE ont été mis au point dans les pays où la prévalence du VHE est élevée et les résultats des tests peuvent être difficiles à interpréter dans les pays où la prévalence de l’infection est faible. Dans les mois précédant la survenue de nos cas, le laboratoire régional n’avait diagnostiqué aucun autre cas d’infection par le VHE provenant d’échantillons d’hépatite aiguë. possible, cependant, que le cluster est un artefact, car après notre premier cas d’infection à VHE a été diagnostiqué, le laboratoire régional et hospi Il se peut que les médecins aient été plus enclins à effectuer des tests de VHE chez d’autres patients atteints d’hépatite aiguë. Indépendamment de la relation entre ces cas, ils indiquent que des cas d’hépatite acquise localement par des souches européennes de VHE peuvent être diagnostiqués aux Pays-Bas. A, l’hépatite aiguë non-B, les tests de routine pour l’infection par le VHE doivent être considérés avec le virus Epstein-Barr, le cytomégalovirus et le virus de l’hépatite C, même en l’absence d’antécédents de voyage à l’étranger, et avant d’exclure un diagnostic de Les tests commerciaux pour la détection fiable de l’infection par le VHE dans les zones de faible prévalence doivent être développés. D’autres études sont nécessaires pour examiner l’épidémiologie du VHE dans les pays développés et pour déterminer si les souches porcines de l’hépatite virale Le VHE peut infecter les humains

Remerciements

Nous remercions le Dr J Schellekens et Henk Hooft d’avoir effectué des tests sérologiques initiaux, le Dr R Koot Sanquin-Laboratoire central du service de transfusion sanguine d’Amsterdam pour effectuer des tests de confirmation et l’autorité sanitaire municipale de Groningue d’avoir interrogé des patients